臻实™HRP标记AGL探针

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臻实™HRP标记AGL探针

货号:1411
Protein AGL-HRP探针是一种基于辣根过氧化物酶(HRP)标记的独家重组蛋白探针,由Protein A、G、L三者的功能性结构域协同优化而成。本产品专为蛋白免疫印迹(Western Blot)、酶联免疫吸附测定(ELISA)及细胞免疫化学检测设计,通过其独特的构象选择性结合机制,显著提升检测特异性与灵敏度,尤其适用于免疫沉淀(IP)后免疫印迹(WB)联用实验体系。

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1. 产品概述

Protein AGL-HRP探针是一种基于辣根过氧化物酶(HRP)标记的独家重组蛋白探针,由Protein A、G、L三者的功能性结构域协同优化而成。本产品专为蛋白免疫印迹(Western Blot)、酶联免疫吸附测定(ELISA)及细胞免疫化学检测设计,通过其独特的构象选择性结合机制,显著提升检测特异性与灵敏度,尤其适用于免疫沉淀(IP)后免疫印迹(WB)联用实验体系。


     2.产品组分与信息


产品名称

货号

规格

臻实™ HRP标记AGL探针

1411

1 mL,1mg/mL


     3. 保存条件

加等体积的灭菌甘油后混匀保存在-20℃,一年有效(注意:加等体积甘油后抗体浓度减半)。


     4.适用范围

特别适用于需要严格验证抗体特异性的免疫共沉淀实验体系。


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图1:上图为鼠IgG,下图为兔IgG;左边为羊二抗HRP探针检测,右边为Protein AGL-HRP探针检测;1、2、3、4带所含IgG量分别为1、2、4和8μg。结果表明,SDS变性还原的IgG不与Protein AGL-HRP探针结合。


Protein AGL 探针对比二抗探针的取代性优势

Protein AGL探针二抗探针
优势一:对一抗的宿主和类型的结合谱广
单一探针可以涵盖Protein A,G和L所有免疫球蛋白的结合谱,检测除IgY之外所有生物医学常用宿主动物的免疫球蛋白,包括抗体的种类如IgG、IgM、IgA、IgE和IgD、它们的亚类以及片段如Fab、scFv和sdAb等。针对不同的一抗宿主、亚型和片段,需要制备不同的二抗探针,极为复杂和混乱。
优势二:特异性强
仅与天然活性免疫球蛋白的表面构象位点结合,不与丧失该位点的失活或变性的免疫球蛋白结合。所以,仅检测结合抗原的活性一抗,不与变性样品的任何成分结合,避免了IP抗体以及样品内源性免疫球蛋白交叉反应的干扰。作为多抗,含有针对变性的IP一抗或样品内源性免疫球蛋白的抗体成分,它造成非靶点信号,严重干扰目的抗原的特异检测。
优势三:灵敏度高
对给定的免疫球蛋白有重、轻链多个位点的协同结合效应,结合检测信号强;单组份、高水溶性探针在固相上的非特异吸附弱,本底低。因而,结合信号和本底信号的高比值产生了高检测灵敏度。在二抗的多抗成分中,只有针对天然活性一抗表面构象抗原决定基的抗体产生特异检测信号,而那些针对变性抗原决定基的抗体在固相表面的吸附只会造成本底;此外,含疏水区的免疫球蛋白在微孔板和印迹膜等固相上的非特异吸附比较严重。上述两种非特异本底降低了检测灵敏度。
优势四:生产变异性小
组份单一,成分固定。动物和免疫原变异性大。


   对比数据

使用Protein A/G/L-HRP作为二抗可有效区分天然构象与变性构象的抗体

通过构建异源抗体检测体系验证了AGL-HRP探针的构象特异性识别优势。实验设计如下:采用小鼠来源IgG2型单克隆抗体作为捕获抗体实施免疫沉淀,以兔多克隆抗体作为检测抗体进行Western Blot分析。该策略通过物种差异有效规避传统同源抗体系统(同物种捕获/检测抗体)可能引发的交叉识别问题,从而精确解析AGL-HRP的构象依赖性结合特性。

AGL-HRP探针具有双重选择性:

(1) 物种选择性:通过Protein A/G/L组合优化,优先结合兔源IgG(检测抗体)

(2)构象选择性:严格识别具有完整三级结构的天然抗体,完全排除变性抗体的非特异性干扰


上一个: 没有了