开萃™NHS活化琼脂糖

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开萃™NHS活化琼脂糖

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利用 NHS和琼脂糖凝胶上的羧基形成活化酯,可以在温和的条件(pH6.5-9)下,偶联高浓度带氨基的各种配基(如抗原,抗体等各种蛋白)。制备成亲和填料或者固定各种配基后形成稳定的共价键,不会轻易脱落,可保存数月。本公司的活化琼脂糖应用新的合成方法,具有配基密度高,流速快,非特异吸附少等优点,是合成亲和填料的不错选择。

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产品名称

基质

偶联蛋白的量

偶联pH

货号

规格

开萃™NHS活化琼脂糖

交联琼脂糖

<15mg/mL蛋白

6.5~9

最佳收益率pH8

1241

湿胶25mL

1242

湿胶100mL

1243

湿胶300mL

1244

湿胶500mL


  注意事项

1、填料需现取现用,以免时间过长造成活性降低,-20℃ 密封保存;
2、如果是偶联小分子的物质可以室温反应,pH和温度可以适当提高,这样会得到更高的偶联效果。如果需偶联的蛋白不稳定,可4℃振荡孵育偶联过夜,以维持配基的活性;
3、如果配基的稳定性不了解,可以用配基配相应浓度的溶液 0.5-1mL,分别选择不同 pH 及温度然后不加填料模拟偶联条件,观察溶液是否有沉淀,有沉淀则偶联效果较差,可通过调节pH 或温度,同时可以加5%左右的甘油或PEG保护蛋白避免沉淀。总之,对于任何配基尽可能先了解其溶解性及稳定性,避免实验失败导致损失,通常pH8.3 左右偶联可取得最佳效果;
4、此填料只能用于带氨基的物质,因为反应效率高而且温和,较适合偶联大分子物质如抗体等;
5、偶联配基后尽快清洗填料,避免配基失活;
6、偶联蛋白的最适pH 为6.5-9 左右,在室温或4℃均可,温度提高能增加配基的偶联效率,根据蛋白的稳定选择合适的pH 和温度,偶联蛋白溶液的浓度为1-10mg/mL。蛋白浓度越高,偶联效率越好,填料体积和配基溶液的体积为1:2或更高;
7、偶联的缓冲液中忌使用氨基的缓冲体系或者如Tris-HCl 缓冲液;
偶联后的磁珠可长期保存在20%乙醇,PBS中,或添加了0.02% ProClin300的PBS中,或添加50%甘油-20℃保存。


   可组合使用的产品


缩霸®大分子快速浓缩试剂盒Amount® BCA蛋白定量试剂盒Amount® TMB沉淀型单组分底物显色液Amount® TMB可溶型单组分底物显色液Amount® ECL发光显色试剂盒
可用于前处理可用于后续分析可用于后续分析可用于后续分析可用于后续分析